ביוטכנולוגיה/מעבדות/קיבוע תאים/ניסוי - קיבוע תאי שמרים באגר
קיבוע תאי שמרים- רקע תיאורטי
[עריכה]הניסוי הבא עוסקים בעקרונות של אחת הטכנולוגיות המתקדמות והנפוצות בביוטכנולוגיה: קיבוע תאים (Cell Immobilization ). טכנולוגיה זו משמשת לצורך יצירת ביוקטליזטור (זרז ביולוגי) אשר ישמש בתהליך יצור של ביוכימיקל כלשהו.לביוקטליזה באמצעות תאים מקובעים או אנזימים מקובעים יש כמה יתרונות לעומת תהליכים רגילים בהם משתמשים בתאים או באנזימים "חופשיים":
- ניתן לרכז כמות קטליזטור גדולה ביחידת נפח של הריאקטור (מתקן הייצור) ולהגיע לקצבי תהליך גבוהים למדי.
- ניתן להריץ את התהליכים באופן רציף ולחסוך הוצאות משמעותיות וזמן תעשייתי יקר.
- הקיבוע מאפשר הפרדה של תוצר התהליך מהתאים המייצרים אותו ללא צורך בתהליך הפרדה נוסף.
מרבית טכניקות הקיבוע מאפשרות "אריזת" כמות מסוימת של תאים או אנזימים בתוך חלקיקי נשא עשויים ג'ל (GEL ) פולימרי. קיימים סוגים שונים של פולימרים יוצרי ג'ל ולכל אחד תכונות חדירות, חוזק , רעילות ועמידות כימית ייחודיות. אנו נעסוק בקיבוע שמרים באגר.
חלק א' (נעשה ע"י הלבורנט)
[עריכה]הכנת תרחיף שמרים באגר בריכוז 2% אגר ו- 10% שמרים.
- המס 2 גרם אגר ב- 75 מ"ל מי ברז, תוך כדי חימום ובחישה מתמדת על גבי פלטה.
- המס 10 גרם שמרים ב- 25 מ"ל מי ברז.
- קרר את תמיסת האגר לטמפ' של כ- 60OC והוסף לתוכה את תמיסת השמרים- בחש מהר.
- ערבב במהירות את התרחיף המתקבל וצוק לתוך מכסים של צלחות פטרי לגובה של כ- 5 מ"מ. הנח לצלחות להתקרר ולהתמצק במשך כחצי שעה.
- חתוך את האגר לקוביות בנפח של 125 מ"מק. (5 מ"מ כל צלע)
- שטוף את קוביות השמרים במי ברז להרחקת עודף השמרים המסיסים.
מהלך עבודה מקוצר / מהלך קיבוע שמר באגר
[עריכה]- 2 גרם אגר ב-75 מ"ל מי ברז.
- ממסים 10 גרם שמרים + 25 מ"ל מי ברז.
- ממתינים עד שהאגר מגיע לטמפרטורה של 60 מעלות צלזיוס ואז שופכים פנימה את השמרים, מערבבים ומיד מוזגים לצלחות פטריות בגובה של כ-1.5 ס"מ.
שימוש במי ברז ולא במים מזוקקים : אנו משתמשים במי ברז כיוון שהם יש מינרלים השומרים על הריכוז האוסמוטי. אם הינו מוספים מי מזוקקים, המים היו חודרים לתוך התאים והשמרים היו מתפוצצים.
פרק זה לוקה בחסר. אתם מוזמנים לתרום לוויקיספר ולהשלים אותו. ראו פירוט בדף השיחה.
 חלק זה של הספר הינו קצרמר. אתם מוזמנים לתרום לוויקיספר ולערוך אותו.
|