ביוטכנולוגיה/אימונודיפוזה רדיאלית בג'ל
שימושי השיטה
[עריכה]- בדיקת נוכחות נוגדנים/אנטיגנים בדוגמא נבדקת.
- בדיקת כמות הנוגדן/אנטיגן שקיימים.
- בדיקת מספר הנוגדנים/אנטיגנים הקיימים בדוגמא הנבדקת.
השלבים עבור דוגמא נבדקת
[עריכה]
- מפזרים בג'ל כמות אחידה של אנטיגנים/נוגדן.
- בתוך גומה במרכז הצלחת שמים את הדוגמא הנבדקת.
- במהלך מספר שעות הבאות, עוברים הנוגדנים/אנטיגנים מהדוגמא לג'ל בתהליך של דיפוזיה.
- כאשר ריכוז הנוגדנים/אנטיגנים שנע בדיפוזיה, וריכוז האנטיגן/נוגדן, נמצאים בתחום המנות השקולות – נוצר משקע לבן בצורת עיגול.
אם נוצר משקע (תלכיד שוקע רק בתחום המנות השקולות) - נוכל לקבוע שבדוגמא הנבדקת יש נוגדן/אנטיגן כנגד האנטיגן/הנוגדן. מספר המעגלים מבטא את מספר האנטיגנים/נגדנים הקיימים בדוגמא.
קביעת כמות האנטיגן/נוגדן בדוגמא הנבדקת באמצעות עקום כיול
[עריכה]כאשר אנו רוצים לדעת את כמות האנטיגן/נוגדן מבצעים את הפעולות הבאות ליצירת קו לינארי :
- לקיחת מספר דוגמיות.
- בדוגמיות שמים אנטיגן / נוגדן מפוזרים באופן זהה.
- שמים במרכז כל דוגמית נוגדן / אנטיגן בכמות ידועה.
- מחכים לתגובה.
- קבלת עקום כיול - בכל דוגמיות נוצר רדיוס בגודל שונה וידוע. ריכוז אנטיגן / נוגדן הם ציר X והרדיוסים בשנייה (d2) הוא ציר Y.
- קבלת משוואת ישר.
- לקיחת הדוגמית הנבדקת, לה אנו רוצים לדעת את ריכוז הנוגדן. בודקים את הרדיוס המתקבל ומציבים בנוסחא.
קישורים חיצוניים
[עריכה]- [1] - אנימצה המתארת את כל התהליך.