ביוטכנולוגיה/אימונודיפוזה רדיאלית בג'ל

שימושי השיטה

1. בדיקת נוכחות נוגדנים/אנטיגנים בדוגמא נבדקת.
2. בדיקת כמות הנוגדן/אנטיגן שקיימים.
3. בדיקת מספר הנוגדנים/אנטיגנים הקיימים בדוגמא הנבדקת.

השלבים עבור דוגמא נבדקת

לאחר הנחת נוגדן במרכז הצלוחית ופיזור של אנטיגן שווה על הצלוחית, הנוגדנים מתחילים לעבור דיפוזיה ומתחברים לאנטיגנים. בעקבות האיחוד נוצר תלכיד אשר ישקע בתחום המנות השקולות.

1. מפזרים בג'ל כמות אחידה של אנטיגנים/נוגדן.
2. בתוך גומה במרכז הצלחת שמים את הדוגמא הנבדקת.
3. במהלך מספר שעות הבאות, עוברים הנוגדנים/אנטיגנים מהדוגמא לג'ל בתהליך של דיפוזיה.
4. כאשר ריכוז הנוגדנים/אנטיגנים שנע בדיפוזיה, וריכוז האנטיגן/נוגדן, נמצאים בתחום המנות השקולות – נוצר משקע לבן בצורת עיגול.

אם נוצר משקע (תלכיד שוקע רק בתחום המנות השקולות) - נוכל לקבוע שבדוגמא הנבדקת יש נוגדן/אנטיגן כנגד האנטיגן/הנוגדן. מספר המעגלים מבטא את מספר האנטיגנים/נגדנים הקיימים בדוגמא.

קביעת כמות האנטיגן/נוגדן בדוגמא הנבדקת באמצעות עקום כיול

כאשר אנו רוצים לדעת את כמות האנטיגן/נוגדן מבצעים את הפעולות הבאות ליצירת קו לינארי :

1. לקיחת מספר דוגמיות.
2. בדוגמיות שמים אנטיגן / נוגדן מפוזרים באופן זהה.
3. שמים במרכז כל דוגמית נוגדן / אנטיגן בכמות ידועה.
4. מחכים לתגובה.
5. קבלת עקום כיול - בכל דוגמיות נוצר רדיוס בגודל שונה וידוע. ריכוז אנטיגן / נוגדן הם ציר X והרדיוסים בשנייה (d2) הוא ציר Y.
6. קבלת משוואת ישר.
7. לקיחת הדוגמית הנבדקת, לה אנו רוצים לדעת את ריכוז הנוגדן. בודקים את הרדיוס המתקבל ומציבים בנוסחא.

קישורים חיצוניים

• [1] - אנימצה המתארת את כל התהליך.