ביוטכנולוגיה/מעבדות/ספקטופוטומטר

מתוך ויקיספר, אוסף ספרי הלימוד והמדריכים החופשי.

קפיצה אל: ניווט, חיפוש

ספקטרופוטומטר – מכשיר למדידת עכירות ; למדידת קרינה הנפלגת או נבלעת עקב מפגש עם חומר.

תוכן עניינים

[עריכה] למה משמש הספקטורופומטר

ספקטורופומטריה הוא ענף העוסק בחקר הקרינה הנבלעת או הנפלט ע"י חומרים שונים. השיטה משמשת במגוון תחומים :

  1. אבחון קליני – אנליזה של מתכות וחומרים שונים בדם או בשתן.
  2. איכות הסביבה – בדיקת ריכוז של חומרים שונים (בעיקר רעלנים) במים ובסביבה
  3. תעשיית התרופות - למדידת ריכוזים הנדרשים (קטנים במיוחד) של מתכות המוספות לתרופות.

[עריכה] כיד פועל המכשיר?

# קרן אור
# האור עובר דרך החור נקרא אור מונוכרומאטי - אור בארוך גל אחד. # עובר דרך המבחנה (I)
# מגיע לגלאי (I_0) - אנרגית האור מותמרת (משתנה) לאנרגיה חשמלית וכך נמדדת כמות האור שעברה דרך התמיסה (T% - אחוז העברה) או כמות האור הנבלע (A - בליעה).
# מד זרם.

[עריכה] אחוז העברה

T%=\frac {I}{I_0}*100

  • I – אור נכנס.
  • I0 – אור יוצא.

[עריכה] בליעה

רוב הספקטופוטומטרים הקיימים היום הם מכשירים שרגישים לרמת בליעה "שתים" (רמת הבליעה הגבוה ביותר). קיימיים כאלה הרגישים לשלוש, אולם, ברוב בתי הספר אינם קיימים. לכן, כאשר נתון בידנו T%, ונרצה לדעת את אחוז הבליעה נבצע את החישוב : {%A=2–log{T.

[עריכה] דוגמא

אם החומר אותו בדקנו היה מים, קרן האור שהייתה יוצאת מהספקטופוטומטר היה זהה, ולכן T% = 100. הצבה בנוסחא תיתן : A = 2 − log100 = 2 − 2 = 0

כלומר, ערכי הבליעה שהתקבלו הם המרבים (אפס – התמיסה צלולה).

[עריכה] חוק בר למברט

Beer lambert.png

החוק קובע כי יש יחס בין ריכוז תמיסה לבליעה שלה : A= \varepsilon_\lambda Cl

  1. A – בליעה
  2. \varepsilon – שיפוע ; מקדם הבליעה.
  3. C – ריכוז חומר נבדק.
  4. l או b- אורך התא ; המרחק שעושה קרן האור בנוזל.

ככל ששיפוע גבוהה יותר = יש יותר ריכוז חלבון, כלומר, T מתקרב לערך T% = 1%.

תמונה חופשיתאין תמונה חופשית

- גרף - שיפוע, C, A.

[עריכה] גל

[עריכה] אורך הגל ( \ \lambda )

Wave-he.png

אורך גל = המרחק בין שני שיאי הגל. יחידות :

  1. עבור גלים ארוכים (כמו גלי רדיו) - נמדד ביחידות של סנטימטר ומטר.
  2. עבור גלים צרים יותר – קייצמים מגוון יחידות, מבין המקובלות :
    • ננומטר (nm). 1nm=0.000000001 מטר.
  3. Å ׁ(אנגסטרם). 1Å = 0.00000001 מטר

[עריכה] תדירות (ν = האות "נו")

תדירות = מספר התנודות שעובר הגל בשנייה אחת. יחידה של התדירות היא HZ (הרץ).

[עריכה] מהירות

לגל קיימות שני מהירויות :

  1. מהירות פאזה – לא נדון.
  2. מהירות חבורה – מהירות הגל במרחב.

[עריכה] מהירות הגל (C)/מהירות אור

הכפלת אורך הגל ותדירות נותנת מהירות הגל/אור :  \ \lambda*\nu =C מהירות האור המהירה שיש 300,000 ק"מ לשנייה (בוואקום).

[עריכה] אורך הגל והאנרגיה העצורה בו

E = h * ν

  • h – משתנה קבוע ע"י פלנק

ככל שאורך הגל קצר יותר יש בתוכו יותר אנרגיה.

[עריכה] תחום אורכי קרינות

  • רדיו 100 מטר
  • מיקרו 100,000 מטר
  • IR – 1000μm
  • האור הנראה – 400-700nm
  • UV – 100nm
  • קרינת X (קרינת רדגן) – 0.1nm
  • קרינת ר"א 0.01nm

[עריכה] איך משתמשים בספקטופוטומטר

פרק זה לוקה בחסר. אתם מוזמנים לתרום לוויקיספר ולהשלים אותו. ראו פירוט בדף השיחה.

[עריכה] ראה גם

[עריכה] קישורים חיצונים