ביוטכנולוגיה/מעבדות/ספקטופוטומטר
מתוך ויקיספר, אוסף ספרי הלימוד והמדריכים החופשי.
ספקטרופוטומטר – מכשיר למדידת עכירות ; למדידת קרינה הנפלגת או נבלעת עקב מפגש עם חומר.
תוכן עניינים |
[עריכה] למה משמש הספקטורופומטר
ספקטורופומטריה הוא ענף העוסק בחקר הקרינה הנבלעת או הנפלט ע"י חומרים שונים. השיטה משמשת במגוון תחומים :
- אבחון קליני – אנליזה של מתכות וחומרים שונים בדם או בשתן.
- איכות הסביבה – בדיקת ריכוז של חומרים שונים (בעיקר רעלנים) במים ובסביבה
- תעשיית התרופות - למדידת ריכוזים הנדרשים (קטנים במיוחד) של מתכות המוספות לתרופות.
[עריכה] כיד פועל המכשיר?
[עריכה] אחוז העברה

- I – אור נכנס.
- I0 – אור יוצא.
[עריכה] בליעה
רוב הספקטופוטומטרים הקיימים היום הם מכשירים שרגישים לרמת בליעה "שתים" (רמת הבליעה הגבוה ביותר). קיימיים כאלה הרגישים לשלוש, אולם, ברוב בתי הספר אינם קיימים. לכן, כאשר נתון בידנו T%, ונרצה לדעת את אחוז הבליעה נבצע את החישוב : {%A=2–log{T.
[עריכה] דוגמא
אם החומר אותו בדקנו היה מים, קרן האור שהייתה יוצאת מהספקטופוטומטר היה זהה, ולכן T% = 100. הצבה בנוסחא תיתן : A = 2 − log100 = 2 − 2 = 0
כלומר, ערכי הבליעה שהתקבלו הם המרבים (אפס – התמיסה צלולה).
[עריכה] חוק בר למברט
החוק קובע כי יש יחס בין ריכוז תמיסה לבליעה שלה : 
- A – בליעה
– שיפוע ; מקדם הבליעה.- C – ריכוז חומר נבדק.
- l או b- אורך התא ; המרחק שעושה קרן האור בנוזל.
ככל ששיפוע גבוהה יותר = יש יותר ריכוז חלבון, כלומר, T מתקרב לערך T% = 1%.
|
|
- גרף - שיפוע, C, A.
[עריכה] גל
[עריכה] אורך הגל (
)
אורך גל = המרחק בין שני שיאי הגל. יחידות :
- עבור גלים ארוכים (כמו גלי רדיו) - נמדד ביחידות של סנטימטר ומטר.
- עבור גלים צרים יותר – קייצמים מגוון יחידות, מבין המקובלות :
- ננומטר (nm). 1nm=0.000000001 מטר.
- Å ׁ(אנגסטרם). 1Å = 0.00000001 מטר
[עריכה] תדירות (ν = האות "נו")
תדירות = מספר התנודות שעובר הגל בשנייה אחת. יחידה של התדירות היא HZ (הרץ).
[עריכה] מהירות
לגל קיימות שני מהירויות :
- מהירות פאזה – לא נדון.
- מהירות חבורה – מהירות הגל במרחב.
[עריכה] מהירות הגל (C)/מהירות אור
הכפלת אורך הגל ותדירות נותנת מהירות הגל/אור :
מהירות האור המהירה שיש 300,000 ק"מ לשנייה (בוואקום).
[עריכה] אורך הגל והאנרגיה העצורה בו
E = h * ν
- h – משתנה קבוע ע"י פלנק
ככל שאורך הגל קצר יותר יש בתוכו יותר אנרגיה.
[עריכה] תחום אורכי קרינות
- רדיו 100 מטר
- מיקרו 100,000 מטר
- IR – 1000μm
- האור הנראה – 400-700nm
- UV – 100nm
- קרינת X (קרינת רדגן) – 0.1nm
- קרינת ר"א 0.01nm
[עריכה] איך משתמשים בספקטופוטומטר
פרק זה לוקה בחסר. אתם מוזמנים לתרום לוויקיספר ולהשלים אותו. ראו פירוט בדף השיחה.