קביעת ריכוז אנטיגנים ע"י נוגדנים מסומנים – לא תחרותי.[עריכה]
קישור אנטיגנים (משולש) לצלחת בדיקה.
הוספת חלבון אינרטי שאינו חלק מהמערכת (לא משתתף) בבדיקה לחסימת אתרים פנויים בצלחת (כדי ש-Ab לא יקשרו לצלחת) + שטיפה.
הוספת Ab מהתמיסה הנבדקת. שנקשר אל האנטיגן.
הוספת מולקולה חלבונית המסומנת בר"א. המולקולה נקשרת לאתר ה-FC של הנוגדנים.
שטיפה – זהו השלב החשוב ביותר.
קביעת כמה אנטיגנים בדוגמא מתוך עקום כיול (לא תחרותי - גרף עולה).
קביעת ריכוז אנטיגנים ע"י נוגדנים מסומנים – תחרותי.[עריכה]
תחרותי - אדם חולה
קישור Ab לצלחת הבדיקה + חלבון אינרטי + שטיפה.
קישור אנטיגנים חם (אנטיגן מסומן בר"א) לצלחת כך שכל ה-Ab קשורים לאנטיגן + שטיפה.
הוספת הדוגמא הנבדקת (משולש ורוד). האנטיגנים בדוגמא אינם מסומנים בר"א והם מתחרים על הקישור לנוגדן.
שטיפה – הכי חשוב.
קביעת ריכוז מתוך עקום כיול (תחרותי – גרף יורד). ככל שיש יותר אנטיגנים מהדוגמא (לא מסומנים – משולשים ורודים) נקשרים, כך הריכוז שלהם יותר גבוהה. אין אנטיגן – רמת ר"א הכי גבוהה.