ביוטכנולוגיה/שיטת R.I.A – בוחן רדיואימוני
אפיון השיטה
[עריכה]- רגישות גבוהה.
- מתבססת על סימון ר"א.
- מסוכנת.
- המכשור יקרה.
תחומי השימוש
[עריכה]פרק זה לוקה בחסר. אתם מוזמנים לתרום לוויקיספר ולהשלים אותו. ראו פירוט בדף השיחה.
Radio Immuno Assay תחרותי/לא תחרותי
[עריכה]
קביעת ריכוז אנטיגנים ע"י נוגדנים מסומנים – לא תחרותי.
[עריכה]- קישור אנטיגנים (משולש) לצלחת בדיקה.
- הוספת חלבון אינרטי שאינו חלק מהמערכת (לא משתתף) בבדיקה לחסימת אתרים פנויים בצלחת (כדי ש-Ab לא יקשרו לצלחת) + שטיפה.
- הוספת Ab מהתמיסה הנבדקת. שנקשר אל האנטיגן.
- הוספת מולקולה חלבונית המסומנת בר"א. המולקולה נקשרת לאתר ה-FC של הנוגדנים.
- שטיפה – זהו השלב החשוב ביותר.
- קביעת כמה אנטיגנים בדוגמא מתוך עקום כיול (לא תחרותי - גרף עולה).
קביעת ריכוז אנטיגנים ע"י נוגדנים מסומנים – תחרותי.
[עריכה]
- קישור Ab לצלחת הבדיקה + חלבון אינרטי + שטיפה.
- קישור אנטיגנים חם (אנטיגן מסומן בר"א) לצלחת כך שכל ה-Ab קשורים לאנטיגן + שטיפה.
- הוספת הדוגמא הנבדקת (משולש ורוד). האנטיגנים בדוגמא אינם מסומנים בר"א והם מתחרים על הקישור לנוגדן.
- שטיפה – הכי חשוב.
- קביעת ריכוז מתוך עקום כיול (תחרותי – גרף יורד). ככל שיש יותר אנטיגנים מהדוגמא (לא מסומנים – משולשים ורודים) נקשרים, כך הריכוז שלהם יותר גבוהה. אין אנטיגן – רמת ר"א הכי גבוהה.