ביוטכנולוגיה/שיטת R.I.A – בוחן רדיואימוני

מתוך ויקיספר, אוסף ספרי הלימוד והמדריכים החופשי.

תוכן עניינים 1 אפיון השיטה 2 תחומי השימוש 3 Radio Immuno Assay תחרותי/לא תחרותי 3.1 קביעת ריכוז אנטיגנים ע"י נוגדנים מסומנים – לא תחרותי. 3.2 קביעת ריכוז אנטיגנים ע"י נוגדנים מסומנים – תחרותי. 4 קישורים חיצונים

[עריכה] אפיון השיטה

• רגישות גבוהה.
• מתבססת על סימון ר"א.
• מסוכנת.
• המכשור יקרה.

[עריכה] תחומי השימוש

חסר

[עריכה] Radio Immuno Assay תחרותי/לא תחרותי

[עריכה] קביעת ריכוז אנטיגנים ע"י נוגדנים מסומנים – לא תחרותי.

1. קישור אנטיגנים (משולש) לצלחת בדיקה.
2. הוספת חלבון אינרטי שאינו חלק מהמערכת (לא משתתף) הבדיקה לחסימת אתרים פנויים במלחת (כדי ש-Ab לא יקשרו לצלחת) + שטיפה.
3. הוספת Ab מהתמיסה הנבדקת. שנקשר אל האנטיגן.
4. הוספת מולקולה חלבונית המסומנת בר"א. המלוקולה נקשרת לאץר ה-FC של הנוגדנים.
5. שטיפה – זהו השלב החשוב ביותר.
6. קביעת כמה אנטיגנים בדוגמא מתוך עקום כיול (לא תחרותי - גרף עולה).

[עריכה] קביעת ריכוז אנטיגנים ע"י נוגדנים מסומנים – תחרותי.

1. קישור Ab לצלחת הבדיקה + חלבון אינרטי + שטיפה.
2. קישור אנטיגנים חם (אנטיגן מסומן בר"א) לצלחת כך שכל ה-Ab קשורים לאנטיגן + שטיפה.
3. הוספת הדוגמא הנבדקת (משולש ורוד). האנטיגנים בדוגמא אינם מסומנים בר"א והם מתחרים על הקישור לנוגדן.
4. שטיפה – הכי חשוב.
5. קביעת ריכוז מתוך עקום כיול (תחרותי – גרף יורד). ככל שיש יותר אנטיגנים מהדוגמא (לא מסומנים – משולשים ורודים) נקשרים, כך הריכוז שלהם יותר גבוהה. אין אנטיגן – רמת ר"א הכי גבוהה.

[עריכה] קישורים חיצונים

• נוגדנים ואימונודיאגנוסטיקה (עמוד 7)