ביוטכנולוגיה/שיטת F.I.A – בוחן אימונופלואורסצנטי

מתוך ויקיספר, אוסף ספרי הלימוד והמדריכים החופשי.

קפיצה אל: ניווט, חיפוש

המטרה : זיהוי אנטיגנים מבוקשים ברקמה.

תוכן עניינים

[עריכה] עקרונות השיטה

  • נוגדן מסומן - נוגדן אליו קשורים קבוצות כימיות פלואורצנטית. כאשר מאירים על קבוצות כימיות אלו קרן אור (באורך גל קצר יותר משלהם) הן פולטות אור.

[עריכה] שלבי השיטה

[עריכה] סימון ישיר של אנטיגן

סימון ישיר
  1. על רקמה יש אנטיגנים (משולשים ; או נוגדנים) אותם אנו רוצים למצוא. לכן, אנו מוסיפים נוגדן אימנופלורסנט. נוגדן האימנופלורסנט הם חומרים אשר בעקבות גירוי מאור, הם פולטים גל אור באורך ארוך יותר הנראה בעין.
  2. האנטיגנים נקשרים + שטיפה
  3. התבוננות במיקרוסקופ פלורסנטי (רואה רק אור פלורסנטי) ואיתור התמצאות האנטיגן.
  • מאירים באור אולטרה סגול וכך מתקבל משטח כהה ואליו מוארים המקומות אליהם נקשר האנטיגן/נוגדן המסומן.




[עריכה] שדרוג - סימון עקיף של אנטיגן

סימון עקיף
  1. על רקמה יש אנטיגנים אותם אנו רוצים לזהות + הוספת נוגדנים (ללא אימנופלורנסט), הם קושרים את 1stAb (נוגדן ראשוני).
  2. הוספת נוגדן שניוני (2ndAb) הנקשר אל FC + שטיפה.
  3. התבוננות במיקרוסקופ.

השדרוג מכפיל את הסימון הפלורסנטי משום שעל כל נוגדן ראשוני נקשרים 2 נוגדנים שניונים – כל אחד מהם מסומן פלורסנטית.




[עריכה] תחומי השימוש

  • איפיון רקמות סרטניות.
  • למחקרים בפיזיולוגיה של התא.

[עריכה] יתרונות וחסרונות

חסר


מקור: http://he.wikibooks.org/wiki/%D7%91%D7%99%D7%95%D7%98%D7%9B%D7%A0%D7%95%D7%9C%D7%95%D7%92%D7%99%D7%94/%D7%A9%D7%99%D7%98%D7%AA_F.I.A_%E2%80%93_%D7%91%D7%95%D7%97%D7%9F_%D7%90%D7%99%D7%9E%D7%95%D7%A0%D7%95%D7%A4%D7%9C%D7%95%D7%90%D7%95%D7%A8%D7%A1%D7%A6%D7%A0%D7%98%D7%99