ביוטכנולוגיה/נשאים כמעבירי גנים

מתוך ויקיספר, אוסף ספרי הלימוד והמדריכים החופשי.

גן זר המוחדר אל חיידק אינו יכול להיכנס לבדו לתא ולשרוד בו. על כן, נחוצה מולקולת דנ"א גדולה אליה נקשור את הגן הזר שתוכל לחדור אל החיידק ולעבור בתוכו שכפול יציב.

מושגים

• נשא = וקטור.
• מֵחְדָר (insert) – הגן הזר המוחדר.
• שיבוט – החדרת מקטע דנ"א, שכפולו בתוך החיידק וריבוי החיידק.

4.3.1 מאפיינים של נשאים יעילים :

• יכולת שכפול עצמית.
• בבעלי יכולת לעבודה In Vitro (במבחנה).
• סמני ברירה.
• מערכת דנ"א שמאפשרת תרגום (מקטע הדנ"א יעבור תרגום ולכן יהיה יצור של החלבון המבוקש)– ATG (חומצה אמינית Met) ופרומטור.
• גודל הנשא – תלוי בסוג הנשא.

[עריכה] 4.3.2 פלסמידים

מקור הפלסמידים וחשיבותם הביולוגית

פלסמיד – מקטע דנ"א מעגלי הנמצא בציטופלזמה של חלק מהחיידקים בתוספת לדנ"א הכרומוזומלי. הפלסמיד מעניק לחיידק תכונות נוספות לאלו הקיימים לו.

חשיבות ביולוגית – שימוש בפלסמיד כנשא.

קיימים 2 סוגים של פלסמידים :

• פלסמיד טבעי – פלסמיד המצוי בטבע.
• פלסמיד סינתטי = פלסמיד מהונדס = פלסמיד רקומביננטי ; פלסמיד לא טבעי - פלסמיד בעל מקטע דנ"א שהוחדר אליו בהנדסה גנטית.

תכונות הפלסמידים וכושר חדירתם לתאי מאכסן  :

• יכולת שכפול עצמית של הפלסמיד – רצף Ori
• קל מאוד לבודד את הפלסמיד מחיידקים והוא יציב מאוד במבחנה.
• סמני ברירה – בדרך כלל סמן הברירה במעבדה יהיה עמידות לאנטיביוטיקה מסוימת, יצור חומר בעל אינדיקאטור ועוד. גן בורר – גן המקודד לתכונה שעוזרת לנו להבדיל בין החיידקים בעלי הפלסמיד ולאלו שאין להם את הפלסמיד.
• אתרי רסטרקציה רבים ושונים.
• המחדר יכול להגיע עד גודל של 10kb (10,000 בסיסים).

יתרונות בשימוש בפלסמיד :

• אין בעיית שכפול (לא כמו לוירוסים).

חסרונות שימוש בפלסמיד :

• גודל המחדר מוגבל לעד 10,000 בסיסים.

[עריכה] 4.3.2 נגיפים